广域小鼠胰岛素试剂盒

广域小鼠胰岛素试剂盒

检测范围：1-40 ng/ml；适用胰岛或β细胞分泌

产品优势：

高质量的 ELISA，用于特异性测量血清、血浆或细胞培养基中的胰岛素

高特异性单抗，灵敏度高。使用 HRP 直接标记检测单抗可实现一步法操作，实验简便省时。

参与发表多篇高影响力论文，包括《自然》主刊。

超微量采血，样本量低至5ul。

适合葡萄糖促进胰岛素分泌实验(GSIS)，口服葡萄糖耐量实验(OGTT)，腹腔注射胰岛素耐量实验(IPITT)。

品类齐全，小鼠、大鼠、人、猪、犬、马、猫、羊、猴等胰岛素试剂盒均有供应。

Q1：如何选择试剂盒？

在不同的实验条件下, 各种样品间的胰岛素含量可以有上千倍的差别, 目前国际上还没有一款试剂盒可以满足如此大的检测范围要求, 因此根据具体的实验情况来选择合适的试剂盒显得尤为重要, 以下建议可供参考:
A. 正常小鼠或大鼠(wild type) 禁食 (fasting) 超过8小时后其胰岛素含量会较低，建议使用超敏试剂盒 (Ultrasensitive kit: 0.05 to 2 ng/ml)。
B. 小鼠或大鼠在饱食状态 (fed) 或禁食不超过6小时，建议使用高敏试剂盒 (High sensitive kit: 0.2 to 6.9 ng/ml)。

C. 在胰岛(Islet)或 β细胞分泌实验中，样品的胰岛素含量较高， 建议使用广域试剂盒 (Wide range kit: 1 to 40 ng/ml)。另外，此类实验通常会出现胰岛素含量很高的样品，使用者需要先通过预实验来确定样品的稀释倍数以取得较好的测定结果。

Q2: 关于GSIS实验有哪些注意事项？

以下是我们的反馈，仅供参考：

a)一般建议小鼠年龄12-20周。禁食时间可能过长，我们接触的研究人员做IGTT，禁食时间~8 小时，供参考。

b)一般腹腔注射葡萄糖后，10分钟可以看到胰岛素明显上升。口服葡萄糖，时间会相应延长。

c)尾部取血，不取第一滴，因为溶血厉害。尽量取顺流出的血样。取血动作一般在30s 内完成。避免溶血标本。分离血清后，为保证样品干净，10,000rpm再次离心2-3分钟。

d)这个实验操作较繁琐，一般需要两个人配合完成。6只老鼠，最好3个人。

e)insulin & glucose 先升高，再降低。但是Insulin 浓度维持的短，Glucose 维持时间长。建议增加取血点 5mins， 10mins。

f)4. High fat diet mice insulin 升高明显，有时成倍增加。但是Lean mice insulin 一般只增加20-30%。

g)标准操作是在有水平震荡仪（600rpm）中孵育。在没有水平震荡仪的情况，请务必确保混匀sample。同时建议增加50%的孵育时间(in the first step)来增强反应信号。具体时间请参考对应货号的说明书。

Q3：用高脂饮食诱导C57小鼠，造成胰岛素抵抗模型，大概需要多少时间？胰岛素抵抗模型建成的指标是哪些？

小鼠6或8 周大起诱导8 至12 周，注射胰岛素看血糖的降幅，一般?照?血糖可降50％左右，抵抗?如果小于20％可认为成功建立，在打完胰导素后二十分钟取第一个血样测血糖，与起点比。

Q4：溶血样品对胰岛素检测是否有干扰？

是的，溶血样品对胰岛素检测有干扰，特别是要避免重度溶血样品。溶血标本会造成检测数值偏低。轻度溶血干扰不大。

建议：尾巴采血时，避免用力按压。针筒抽血后，应把针头去掉再把血液样品打出。

Q5：脂肪含量高的样本如何处理？

因为脂对抗原抗体的结合有干扰，所以高血脂样品对胰岛素检测有干扰。

建议：4°C 高速离心，取上清。枪头尽量避免固体部分。如无法避免碰到油脂，可以重复离心。（也可以用纸巾把Tip头上的油脂轻轻擦掉，再打出样品）

Q6: 可以测血浆，血清中的胰岛素浓度吗？

可以。ELISA试剂盒是测液体中的胰岛素，包括血清，血浆，组织研磨液和细胞培养上清等。