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AapCas12b(C2c1)

AapCas12b(C2c1) 核酸内切酶产品概述AapCas12b(又名C2c1)来源于嗜酸耐热菌Alicyclobacillus acidophilus,是

1260
规格P: 100 pmoL 1000 pmoL
数量:
货号:E0804H1      *大包装订购及定制,请电询

AapCas12b(C2c1) 核酸内切酶

产品概述

AapCas12b(又名C2c1)来源于嗜酸耐热菌Alicyclobacillus acidophilus,是一种依赖于crRNA和tracrRNA共同介导的(或融合后的sgRNA单独介导的)DNA核酸内切酶。在靶标双链DNA存在PAM (TTN) 序列的情况下,剪切反应温度可达60~65℃。在靶标双链DNA存在PAM(5'-TTN-3')的情况下,可特异地剪切靶标双链DNA,使DNA双链断裂并生成粘性末端。而AapCas12b特异地剪切单链DNA靶标不依赖PAM序列。此外,双链或单链DNA靶标均能激活AapCas12b的反式剪切活性(即旁路剪切活性/附属剪切活性),即当AapCas12b酶与sgRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后,便会被激活针对非特异序列ssDNA的反式剪切活性,可无差别地剪切反应体系中任意序列的ssDNA。AapCas12b比AacCas12b 。因此,也更适用于与LAMP联用,开发"一管法"恒温扩增/CRISPR-Cas检测体系。


gRNA/gRNA 与 Cas12b 结合,形成功能复合物,被目标 序列特异性激活。

AapCas12b(C2c1) sgRNA scaffold sequence 结构序列为:  5'- GUCUAGAGGACAGAAUUUUUCAACGGGUGUGCCAAUG GCCACUUUCCAGGUGGCAAAGCCCGUUGAGCUUCUCAA AUCUGAGAAGUGGCAC -3'


产品组分

组分

E0808H1 (100 pmol)

E0808H3(1,000 pmol)

AapCas12b(C2c1)  Nuclease (10 μM) 

100 pmol

1,000 pmol

10 × AapCas12b(C2c1) Reaction Buffer

1 mL

1 mL

AapCas12b(C2c1) Nuclease 1000 pmol规格的浓度为10 μM,即10 pmol/μL,1000 pmol规格的总体积为100 μL


反应体系

名称

推荐用量/终浓

优化范围

10 × Cas12b Reaction Buffer

×

-

Reporte(fluorescence

20nM

100 ~ 50nM

sgRNA

500 nM

400   ~ 600   nM

AapCas12b(C2c1) 蛋白

30nM

200   ~ 600   nM

上一步反应的扩增产物

适量

0-5ul

H2O

补齐到 2μL

-


保存条件

组分-20℃储存;≤ 0℃运输。


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