环状DNA甲基化测序
环状DNA甲基化测序
体液样品环状DNA测序
环状DNA的形成机理
目前研究表明,环状DNA是从染色体上断裂、环化或者额外复制产生的序列,其剪切加工机理主要提出有两种可能:(1)通过染色体异位同源重组环化(intrachromatid ectopic homologous recombination,HR);(2)通过非同源染色体末端连接环化(nonhomologous end-joining,NHEJ)。环状DNA形成是一个复杂的过程,更多环化方式有待探索。
技术简介
针对血清、血浆、尿液、脑脊液等微量的体液样品,参考卢煜明教授团队开发的方法,酶切去除线性DNA后,利用Tn5转座酶,打开环状DNA环状结构并同时在DN**段两端加上接头,进行建库及测序。Tn5转座酶法效率高,损耗低,实现血液循环系统中微量的环状DNA的检测,双端测序,上机测序数据量24G。并且本产品能保留环状DNA的原始表达量,使得不同环状DNA间的表达量的比较更为准确。并通过严谨的环状DNA生信流程,实现了对环状DNA准确的识别和详细的基因注释。
技术优势
适用于微量体液样品:
此法减少DNA损失,并保留原始表达量,不同环状DNA间表达量比较更准确
专业的生物信息学分析:
专业的生物信息学团队,开发了高效识别分析环状DNA的算法,满足客户的各类深入数据分析需求。
一站式服务:
客户只需提供血清、血浆、尿液、脑脊液等体液,云序生物为您完成从样品准备、环状DNA富集、文库制备、上机测序到数据分析整套服务流程。
样本要求
样品类型:
血清、血浆、尿液、脑脊液。
样品量:
血清、血浆:5mL
尿液:5-10mL
脑脊液: 5mL
样品运输及保存:
样品干冰运输。血浆需使用EDTA抗凝管(紫色盖子抗凝管),勿用肝素管取样。
数据分析
1.环状DNA的识别及甲基化水平
2.环状DNA的基因注释
3.环状DNA长度分布图
4.环状DNA甲基化水平统计
案例解析
案例1:孕妇血浆中胎儿环状DNA 的特征是:呈甲基化状态以及被**
原文:Characteristics of Fetal Extrachromosomal Circular DNA in Maternal Plasma: Methylation Status and Clearance
期刊:Clinical Chemistry 影响因子:8.322
近期,NIPT之父卢煜明教授团队开发了一种环状DNA 甲基化分析的测序方案,通过对不同产后时间点的胎儿环状DNA含量的评估,研究了胎儿环状DNA的体外**效率。作者还发现血浆中的胎儿 环状DNA 与母体 环状DNA 相比甲基化程度相对较低。此外,和胎儿线性DNA类似,胎儿环状DNA在分娩后从母血中迅速**。总之,该团队基于转座酶和m5C位点酶学转化方法开发出了环状DNA甲基化测序技术,并揭示了孕妇血浆中的胎儿环状DNA甲基化状况,为环状DNA的深入研究及新型分子标志物的开发提供了新的技术手段。