TB1化学转化感受态
TB1 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌TB1{基因型:F- ara Δ(_lac_-_pro_AB) _rps_L (StrR)[φ80 d_lac_
TB1 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌TB1{基因型:F- ara Δ(_lac_-_pro_AB) _rps_L (StrR)[φ80 d_lac_
产品简介
本品为大肠杆菌TB1{基因型:F- ara Δ(_lac_-_pro_AB) _rps_L (StrR)[φ80 d_lac_Δ(_lac_Z)M15] thi _hsd_R}制作的感受态。该菌株源于JM 83,是JM83 hsdR型菌株,只含有大肠杆菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNApolymerase,适合NEB公司的pMAL系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use theE. coli RNA polymerase),不能用于pET系列质粒的表达,具有链霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
TB1化学转化感受态 | EE034-H-S | 10×100 μL |
EE034-H-M | 50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月)
转化方法
1. 从-80 ℃ 冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;
2. 放42℃ 水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;
3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃ 摇床200 rpm培养60 min;
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板(若质粒浓度较高,需要稀释后涂板),37℃ 培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。