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NovaBlue(DE3)化学转化感受态

NovaBlue(DE3)化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌NovaBlue(DE3){基因型:F`[ _pro_A+B+ _lac_Iq ZΔM15::T

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数量:
货号:C0591           

NovaBlue(DE3)化学感受态细胞


产品简介

本品为大肠杆菌NovaBlue(DE3){基因型:F`[ _pro_A+B+ _lac_I ZΔM15::Tn10 (TetR)] _end_A1 _hsd_R17(rk12-,mk12+) _sup_E44 thi -1 _rec_A1 _gyr_A96 _rel_A1 lac(DE3)}制作的感受态。该菌种来源于K12菌株,具有极高的转化效率,是转化效率最高的原核表达菌株,可同时用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区,使得NovaBlue(DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,广泛用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)菌株具有四环素抗性,_end_A1和_rec_A1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取;_lac_ZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑筛选。NovaBlue(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>109cfu/μg DNA。


产品规格

品名

规格

NovaBlue(DE3)化学转化感受态

10×100 μL


50×100 μL

-80℃(12个月)


转化方法

1. 从-80 ℃ 冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;

2. 放42℃ 水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃ 摇床220 rpm培养60 min;

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃ 培养箱放置过夜。


注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。

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