JM109(DE3)化学转化感受态
JM109(DE3) 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM109(DE3){基因型：_end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _
JM109(DE3) 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM109(DE3){基因型：_end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _
产品简介
本品为大肠杆菌JM109(DE3){基因型：_end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _hsd_R17 (rk-,mk+) _rel_A1 _sup_E44 D (_lac_-_pro_AB) [F? _tra_D36 _pro_AB _laqI_ qZΔM15](DE3)}制作的感受态。该菌株来源于JM109，用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET 系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于JM109的染色体上，所以称为JM109(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。JM109(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu /μg DNA。
产品规格
品名 | 货号 | 规格 |
JM109(DE3)化学转化感受态 | EE017-H-S | 10×100 μL |
EE017-H-M | 50×100 μL |
-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。
