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BL21(DE3) pLysS化学转化感受态

BL21(DE3)pLysS 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BL21(DE3)pLysS [基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB-

360
数量:
货号:C0519           

BL21(DE3)pLysS 化学转化感受态细胞


产品简介

本品为大肠杆菌BL21(DE3)pLysS [基因型:F- _omp_T _hsd_SB(rB- mB- ) gal dcm(DE3) pLysS CamR]制作的高效感受态。该菌整合了λ噬菌体DE3区(该区域含有T7噬菌体RNA聚合酶);同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于PET、pGEX和pMAL等质粒的蛋白表达;菌株携带有pLysS质粒,具有氯霉素抗性,pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽寡聚糖,溶解大肠杆菌,降低目的基因的背景表达,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白;pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA。


产品规格

品名

货号

规格

BL21(DE3)pLysS化学转化感受态

EE009-H-S

10×100 μL


EE009-H-M

50×100 μL

保存条件:-80℃(12个月)


转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;

2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;

4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。

注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 诱导蛋白表达时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。

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