BL21化学转化感受态
BL21 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BL21{基因型：E. coli B F- _dcm omp_T _hsd_S(rB- mB-) gal [_ma
BL21 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌BL21{基因型：E. coli B F- _dcm omp_T _hsd_S(rB- mB-) gal [_ma
产品简介
本品为大肠杆菌BL21{基因型：E. coli B F- _dcm omp_T _hsd_S(rB- mB-) gal [_mal_B+]K-12(λS)}制作的感受态。BL21是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21 (DE3)、Rosetta、OrigamiB (DE3)等菌株均由该菌株改造而来；该菌株不含有T7 RNA聚合酶，不能用于T7启动子驱动的蛋白表达（如：PET系列质粒）；该菌含有大肠杆菌RNA聚合酶，可用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核表达系统（如：pGEX和pMAL等质粒）；pUC19 质粒检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
BL21化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 吸取100μL菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 诱导蛋白表达时，IPTG 浓度可选（0.1-2 mM 均可）。
