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JM110化学转化感受态

JM110 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM110(基因型:_rps_L (StrR) _thr leu thi_-1 _lac_Y _gal_K _g

360
数量:
货号:C0577           

JM110 化学感受态细胞


产品简介

本品为大肠杆菌JM110(基因型:_rps_L (StrR) _thr leu thi_-1 _lac_Y _gal_K _gal_T ara _ton_A _tsx dam dcm sup_E44 Δ(_lac-pro_AB) /F′ [_tra_D36 _pro_AB _lac_Iq_lac_ZΔM15])制作的高效感受态,菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR);是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对dam、dcm 甲基化敏感的内切酶切割;_lac_Iq_lac_ZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高。JM110 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率约107 cfu/μg DNA。


产品规格

品名

规格

JM110化学转化感受态

10×100 μL


50×100 μL

-80℃(12个月)


转化方法

1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞,放入冰中5 min,加入目的质粒或连接产物,轻弹使混合均匀,并在冰中孵育30min;

2. 放42℃水浴锅中热激90 s,立即插入冰中静置2-3 min;

3. 添加900 μL LB液体培养基,37℃摇床220 rpm培养60 min;

4. 离心(质粒转化无需离心,吸取100μL菌液涂布即可),倒掉上清,余下菌液均匀涂布抗性平板,37℃培养箱放置过夜。


注意事项

1. 感受态细胞解冻后应立即使用,不可在冰中放置过长时间。

2. 不能用移液器抽吸感受态细胞,用手指轻弹混匀即可。

3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。

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