JM108化学转化感受态
JM108 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM108（基因型：F- _end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _rel_A1 _g
JM108 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌JM108（基因型：F- _end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _rel_A1 _g
产品简介
本品为大肠杆菌JM108（基因型：F- _end_A1 _rec_A1 _gyr_A96 _thi_-1 _rel_A1 _gln_V44 Δ(_lac-pro_AB) _hsd_R17 (rK- mK+)）制作的高效感受态，来源于JM106菌株，最初是作为黏粒文库的宿主被改造而成。JM108菌株缺失核酸内切酶 (endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入 DNA 的稳定性。JM108菌株最大的特点是扩繁质粒产量大，纯度高，且质量稳定，特别是超螺旋质粒比例较高，超螺旋质粒所占比例一般>90%(gyrA96 突变型说明JM108菌株的DNA-gyrase基因被突变，导致拓扑异构酶Ⅱ的功能受影响，增加了超螺旋质粒的比例)，非常适合后续的动物细胞转染实验（超螺旋质粒可提高细胞转染的效率）。此外该菌株具有萘啶酸抗性。JM108感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>0.5×109 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
JM108化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
