OmniMAX 2 T1化学感受态细胞

产品简介 :

OmniMax2-T1 来源于大肠杆菌 K12, 经过改良后适用于所有的克隆应用，包括 Gateway 技术。此外， OmniMax2-T1 还能有效转化高度甲基化的 DNA。由于该菌株携带 tonA 基因突变，因此对 TI 和 T5 噬 菌体感染具有抗性。本产品OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞是采用特殊工艺处理得到，可用于 DNA 的化学转化。使用 pUC19 质粒检测，转化效率 108cfu/μg DNA 以上。

基  因  型：F'proAB lacIq lacZΔM15 Tn10 (TetR) Δ(ccdAB) mcrA Δ(mrr hsdRMS-mcrBC) φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD

产品规格 :

 备注：以上包装均含有 Compcell Control Plasmid pUC19(0.1ng/μl)5μl（质量控制用）。

储存 : -70℃ 保存六个月。

操作步骤 :

以下操作均按无菌条件的标准进行 :

■ 转化：取感受态细胞置于冰浴中（解冻 1-2 分钟），加入目的 DNA，轻轻混匀，在冰浴中放置 30 分钟。

注意：所使用 DNA 体积不要超过感受态细胞悬液体积的 1/10，100μl 感受态细胞能够被 1ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和。

■ 热激：将离心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却 2-3 分钟，该过程不要摇动离心管。

■ 复苏：向每个离心管中加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 180rpm 摇床振荡培养 45-60 分钟，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

■ 涂板：根据实验要求（质粒，重组连接产物转化），吸取适量体积已转化的感受态细胞加到含相 应抗生素的 SOC 或 LB 固体琼脂培养基上，将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体 被吸收，倒置平板，37℃培养 12-16 小时。

操作提示 :

.刚刚化冻的细胞，转化效率最高。化冻后感受态细胞冰浴条件下，半小时内活性无明显变化，因 此，同时转化多支感受态细胞时尽量半小时内加完目的DNA。

.感受态细胞应保存在  -70℃，请避免反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

. 进行转化操作时，请在无菌条件下，根据相应温度要求进行实验。

.避免用移液枪吹吸，整个过程要轻柔，尽量低温操作。

.为防止转化实验不成功，建议至少转化 100ng 以上 DNA。