W3110化学转化感受态
W3110 化学转化感受态细胞产品描述W3110是K-12的衍生菌株,消除了F和lambda,是一种经过较少改造,比较接近于WT-野生型的大肠杆菌工程菌株。不含
W3110 化学转化感受态细胞产品描述W3110是K-12的衍生菌株,消除了F和lambda,是一种经过较少改造,比较接近于WT-野生型的大肠杆菌工程菌株。不含
产品描述
W3110是K-12的衍生菌株,消除了F和lambda,是一种经过较少改造,比较接近于WT-野生型的大肠杆菌工程菌株。不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液尽量去除核酸酶,以防提取的质粒被降解。经pUC19质粒转化检测,W3110感受态细胞的转化效率可达108 cfu/μg DNA。
基因型:F- lambda- IN(rrnD-rrnE)1 rph-1
产品规格
品名 | 规格 |
W3110 化学感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件:-80℃(12个月);请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。