TOP10F'化学转化感受态
TOP10F` 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌TOP10F`（基因型：F'{_lac_Iq _Tn_10 (TetR)} _mcr_A Δ(_mr
TOP10F` 化学感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌TOP10F`（基因型：F'{_lac_Iq _Tn_10 (TetR)} _mcr_A Δ(_mr
产品简介
本品为大肠杆菌TOP10F`（基因型：F'{_lac_Iq _Tn_10 (TetR)} _mcr_A Δ(_mrr-hsd_RMS-_mcr_BC) _Φ80lac_ZΔM15 Δ_lac_X74 _rec_A1 _ara_D139 Δ(_ara-leu_)7697_gal_U _gal_K _rps_L _end_A1 _nup_G）制作的高效感受态，来源于TOP10菌株。将F'{_lac_Iq _Tn_10 (TetR)}因子转入TOP10菌株，即为TOP10F`。该F`因子携带lacIq抑制子，可抑制trc，tac，lac等启动子下游基因的表达，从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。recA1和 endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选实验（如用于蓝白斑筛选，需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达），具有四环素抗性。TOP10F`感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
TOP10F`化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
