DB3.1化学转化感受态
DB3.1 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌DB3.1（基因型：F- _gyr_A462 _end_A1 _gln_V44 Δ(_sr1_-_rec_A
DB3.1 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌DB3.1（基因型：F- _gyr_A462 _end_A1 _gln_V44 Δ(_sr1_-_rec_A
产品简介
本品为大肠杆菌DB3.1（基因型：F- _gyr_A462 _end_A1 _gln_V44 Δ(_sr1_-_rec_A) _mcr_B _mrr hsd_S20(rB-, mB-) _ara_14 _gal_K2 _lac_Y1 _pro_A2 _rps_L20(SmR) _xy_l5 Δ_leu mtl_1）制作的高效感受态，菌株基因组中含有gyrA462 基因，赋予其对ccdB 毒性基因的抗性，特别适用于构建或扩繁含有ccdB 基因的质粒载体 (例GATEWAY System vector)，此菌株具有链霉素抗性。DB3.1 感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
DB3.1化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
