Stbl2化学转化感受态
Stbl2 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌Stbl2（基因型：F- _mcrA_Δ(_mcr_BC-_hsd_RMS-mrr) _rec_A1 _en
Stbl2 化学转化感受态细胞产品简介本品为大肠杆菌Stbl2（基因型：F- _mcrA_Δ(_mcr_BC-_hsd_RMS-mrr) _rec_A1 _en
产品简介
本品为大肠杆菌Stbl2（基因型：F- _mcrA_Δ(_mcr_BC-_hsd_RMS-mrr) _rec_A1 _end_A1 lon _gyr_A96 thi _sup_E44 _rel_A1λ-Δ(_lac_-_pro_AB)）制作的高效感受态，菌株来源于 JM109 ，适合克隆不稳定插入片段 (正向重复序列，逆转录病毒序列等)；mcrA 突变和mcrBC-hsd RMS-mrr基因缺失使该菌株更适于克隆甲基化的基因组序列；同时Stbl2也可用于慢病毒载体的构建。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。Stbl2感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>109 cfu/μg DNA。
产品规格
品名 | 规格 |
Stbl2化学转化感受态 | 10×100 μL |
50×100 μL |
保存条件：-80℃（12个月）
转化方法
1. 从-80 ℃冰箱中取出感受态细胞，放入冰中5 min，加入目的质粒或连接产物，轻弹使混合均匀，并在冰中孵育30min；
2. 放42℃水浴锅中热激90 s，立即插入冰中静置2-3 min；
3. 添加900 μL LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养60 min（当质粒中含有不稳定片段时，30℃复苏可降低错误重组的概率，）；
4. 离心（质粒转化无需离心，吸取100μL菌液涂布即可），倒掉上清，余下菌液均匀涂布抗性平板，37℃培养箱放置过夜（当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率）。
注意事项
1. 感受态细胞解冻后应立即使用，不可在冰中放置过长时间。
2. 不能用移液器抽吸感受态细胞，用手指轻弹混匀即可。
3. 质粒使用量<50 ng即可获得很好的转化。
