LbaCas12a(Cpf1)
LbCas12a(Cpf1)来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006菌株，是一种由crRNA单独引导的DNA核酸内切酶。
LbaCas12a(Cpf1)，LbaCas12a(Cpf1)来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006菌株，是一种由crRNA单独引导的DNA核酸内切酶。
在靶标双链DNA存在PAM (TTTN) 序列的情况下，LbaCas12a可特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成粘性末端。当靶标为单链DNA时，LbaCas12a可特异地剪切单链DNA靶标不依赖PAM序列。
此外，双链或单链DNA靶标均能激活LbaCas12a的反式剪切活性(又称为,旁路剪切活性或附属剪切活性)，即当LbaCas12a酶与crRNA、靶标DNA发生识别并结合后，便会被激活针对非特异单链DNA(ssDNA)的反式剪切活性，可将反应体系中的ssDNA切碎。因此，LbaCas12a酶不仅可用于体外dsDNA的特异剪切，也可用于靶标核酸的快速检测。
Cas12a与Cas9相比，具有以下不同:
（1）Cas12a的反应只需要单个crRNA，且体积更小、更易被递送至细胞中；
（2）Cas12a切割后产生粘性末端，更利于基因组精确编辑；
（3）Cas12a的切割位点远离其识别位点，为连续多次编辑提供了可能性；
（4）基于Cas12a识别的PAM序列与Cas9不同，提供了不同编辑位点的选择可能。
针对不同种属来源的Cas12a蛋白，其识别靶标所需的PAM位点会存在差异。其中部分Cas12a蛋白识别TTTN位点。如果在Cas12a蛋白的C端融合了NLS核定位信号，可被用于细胞内的基因编辑。
组分 | E0801H1 (100 pmol) | E0801H3(1,000 pmol) |
LbaCas12a(Cpf1) Nuclease (10 μM) | 100 pmol | 1,000 pmol |
10 × LbaCas12a(Cpf1) Reaction Buffer | 1 mL | 1 mL |
LbaCas12a Nuclease 1000 pmol规格的浓度为10 μM，即10 pmol/μL，1000 pmol规格的总体积为100 μL
名称 | 推荐用量/终浓度 | 优化范围 |
10 × Cas12a Reaction Buffer | 1 × | - |
Reporter (fluorescence） | 120 nM | 40 ~ 160 nM |
crRNA | 50 nM | 40 ~ 160 nM |
LbaCas12a 蛋白 | 50 nM | 40 ~ 160 nM |
上一步反应的扩增产物 | 适量 | 0-5ul |
H2O | 补齐到 20 μL | - |
组分-20℃储存；≤ 0℃运输。
